酶底物法程控定量封口机检测大肠杆菌方法

来源:西安海研生物科技公司         发布时间:2019-04-18

采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越精确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,精确掌握水样稀释倍数对测定结果就越精确。

程控定量封口机

加入含有总大肠菌群细菌的水样,放入程控定量封口机中,目标细菌在Minimal

MediumONPG-MUG培养基中36℃培养,总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β

一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色;

同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG

培养基中的荧光底物MUG,产生特征性荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5

℃培养时会分解MinimalMediumONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG

,使培养基呈现黄色。

9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97

孔定量盘提供简单、快速、精确的定量检测总

大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪(耐热)大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法可能数(MPN)

统计模型而设计的半自动定量方法。

程控定量封口机自动将样品/试剂混合液分配到独立孔中。

培养结束后,阳性孔数可以转化为MPN值。

51孔定量盘可检测每100mL水样中1-200MPN值。

97孔定量盘可检测每100mL水样中1-2,419MPN值。

整个检测过程手工操作时间小于1分钟。

【使用方法】

定性测试:

第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解,36℃培养24h;

第二步、结果判读

无色=阴性

黄色=总大肠菌群阳性

黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性

注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色为阳性

定量检测

第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解;

第二步、倒入51孔定量检测盘(定量孔板)或97孔定量检测盘(定量孔板)中;

第三步、用程控定量封口机对定量检测盘(定量孔板)进行封装,36℃培养24h;

第四步、51孔定量检测盘(定量孔板)结果判读:

无色=阴性

黄色格子=总大肠菌群阳性

黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性

查对照MPN表计数

注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数。

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