• 酶底物检测方法
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酶底物法MUG试剂-总大肠专用


介绍

      酶底物法检测试剂可以同时检测水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热()大肠菌群,GB/5750.122006国家标准检验方法,其原理是根据固定底物技术酶底物法( Defined substrate Technology DST")。如果水样中存在总大肠或者耐热()大肠菌群,则它的特异性代谢产物与试剂( MMO-MUG培养基)的主要成分0NPG反应,使溶液显黄色;如水样中有大肠埃希氏菌,则它的特异性代谢产物与MM0MUG培养基中的MUG反应使溶液显荧光。并且可以在24小时内同时检测出总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热()大肠菌群,并可以抑制100m水样中的2百万个杂菌干扰,最低检出限为1ctu(总大肠菌群和大肠埃希氏菌或者耐热()大肠菌群)/100m水样。

包装

每包装100个检测试剂,用于检测100mL水样。

储存条件

2-30°0避光储存。

定性检测

1.将一个包装试剂倒入装有100m水样的无菌取样瓶中。

2.盖上盖子,摇匀。

3.放在36±1℃培养24小时;或者放在44.5±0.2,培养24小时。

4.根据下表的说明判断定性检测结果。

定量检测(用于检测100m水样)

1.将一个试剂倒入装有100m水样的无菌取样瓶中。

2.盖上盖子,摇匀。

3.将水样全部倒入51孔或97孔定量盘中,使用专用的程控定量封口机封口。

4.放在36±1℃培养24小时;或者放在44.5±0.2,培养24小时。

5.根据下表的说明读取定量检测结果,数出阳性格子数后对照MPN表得到定量检测结果

检测结果说明

现象

结果

36±144.5±0.2温度下培养24小时,颜色比阳性对照物的黄色浅

总大肠菌群,大肠埃希氏菌阴性耐热()大肠菌群阴性

36±1培养24小时,颜色与阳性对照物的黄色相同或者颜色更深

总大肠菌群为阳性

44.5±0.2℃培养24小时,颜色与阳性对照物的黄色相同或者颜色更深

耐热()大肠菌群阳性

36±1℃培养24小时,颜色与阳性对照物的黄色相同或者颜色更深,且在紫外灯下显荧光

大肠埃希氏菌为阳性

 

在暗室中,使用6,366nm的紫外灯在距样品1厘米左右的位置观测是否显荧光。

结果应在24-28小时内读取。此外,总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热()大肠菌群培养时间小于2小时已经为阳性;或总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热()大肠菌群大于28小时依然为阴性,则结果也有效。

实验注意点

 检测试剂可以使用多管法进行检测。检测结果可参阅《水与废水检验标准测试方法》中的MPN

 如果水样品有背景颜色,请做一个空白试验,与检测结果相比较

 如果水样品被稀释,则在读取MPN表时乘以相应的稀释倍数

 只可使用灭菌水,不含缓冲液的水,不含氧化剂的水进行样品稀释。

 试剂用于常规水样检测,不可以用于浓缩水样。

 ⑥如果样品中含有过多的氯,则加入科立得可能显蓝光,则该水样不可用。

 无需在无菌室中进行但操作过程应避免微生物污染



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